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          MoBio NoviPure™土壤蛋白質提取試劑盒 NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit
        MoBio產品 / 土壤總蛋白提取試劑盒

        提取各種類型土壤蛋白,不受腐殖質等干擾雜質影響。

        提取次數: 貨號:
        20 次 30000-20
        產品特點
        • 強力裂解 - 采用優化的珠磨研磨方法,可高效裂解真菌、革蘭氏陰性菌及革蘭氏陽性菌細胞并溶解菌體總蛋白
        • 快速簡便提取總蛋白 - 新型離心柱方法提取蛋白質過程無需沉淀,全程僅需22 min
        • 結果精確 -所得蛋白質可用于質譜分析、一維和二維電泳、以及其他蛋白組學相關應用
        描述

        NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit專門設計用于所有類型土壤微生物胞外、胞內蛋白提取,不受腐殖質等干擾雜質影響。正在申請專利的雙緩沖液提取法加上玻璃珠、陶瓷研磨珠能高效裂解細胞,并溶解所有胞外、胞內蛋白質。相對于SDS水煮、熱蒸汽與NaOH結合等傳統提取方法,最終蛋白沉淀非常干凈不含雜質。加入緩沖液重懸蛋白沉淀后可用于進一步分析或保存。使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取的蛋白質已經成功地在一維電泳和質譜分析法(2D LC-MS/MS)中使用。為保護珍貴樣品,所有試劑及塑料制品都不含任何蛋白酶或蛋白。試劑盒說明書專門優化提取變性蛋白,要提取天然蛋白只需對操作流程進行少許修改即可。

        研究與深入

        圖1:使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取堆肥樣品獲得更干凈的蛋白質


        (A) NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit試劑盒法(條帶1、2)與蔗糖、苯酚提取法①(條帶4、5)分別提取兩個加入白念球菌(C. albicans)的5g預先滅菌堆肥樣品總蛋白。NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit(條帶3)與蔗糖、苯酚法(6)再提取白念球菌(C. albicans)純培養作為對照。

        (B) NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit試劑盒法(條帶1、2)與SDS煮沸提取法(條帶3、4)分別提取兩個加入大腸桿菌(E. coli)的5g預先滅菌堆肥樣品總蛋白。

        每樣取20μl總蛋白跑一維SDS-PAGE電泳,Stain Free凝膠成像系統③可視化處理。NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit所獲得的蛋白背景清晰無拖尾,可見蛋白條帶?梢姼迟|等干擾雜質非常少。

        圖2:使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取復雜類型土壤樣品獲得高蛋白質得率

        使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取加入了大腸桿菌(E. coli)的5g預先滅菌土壤及沉積物的總蛋白。每樣取20μl總蛋白跑一維SDS-PAGE電泳,Stain Free凝膠成像系統③可視化處理。所有樣品都能獲得清晰蛋白條帶,并與大腸桿菌純培養陽性對照相符。(條帶1、2)- 淡水湖沉積物;(3、4)- 瀉湖沉積物;(5、6)- 沙灘沙子;(7、8)- 大田土壤;(9、10)- 大腸桿菌純培養。

        圖3:使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取的蛋白質在二維凝膠電泳中獲得成功結果

        使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取加入了大腸桿菌(E. coli)的5g預先滅菌土壤及沉積物的總蛋白。每樣取20μl總蛋白,pH3-10 二維SDS-PAGE電泳后銀染分析?梢姷鞍踪|清晰可見無腐殖質等干擾物。

        圖4:使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取的蛋白質在2D LC - MS/MS中獲得精確的結果

        蛋白質質譜峰圖。為強陽離子交換分離后的一部分。由NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit 提取5g加入E. coli滅菌堆肥的總蛋白,胰蛋白酶酶解成肽段,再對這些肽段用2D-MS/MS進行鑒定與分析。原色譜比對SWISSPRO數據庫(最新版本2013年5月)。結果鑒定出1076種不同蛋白。

        ①Taylor & Williams, 2013 Microb. Ecol. 59:390-99

        ②Chourey et al. 2010 J. Proteome Res. 9:6615-22

        ③BIORAD mini PROTEAN® TGX Stain-Free™ Gels


        土壤微生物胞內、胞外總蛋白提取

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        規格
        提取方法 專利申請中的雙緩沖液提取法
        細胞破碎 研磨珠破碎
        處理樣品量 2-5g
        儀器要求 渦旋混合儀
        適配器(50ml)
        50ml 管離心機(4500×g)
        小型離心機(20000×g)

        保存條件
        室溫(15-30℃)保存。SP1和SP2溶液使用前先冷藏。
        試劑盒組分
        組分 30000-20
        NoviPure™ Bead Tubes
        Solution SP1
        Solution SP2
        50ml Falcon™ Collection Tubes
        1.7ml Low-Protein Binding Tubes
        20
        500ml
        32ml
        40
        20

        產品介紹彩頁
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